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熒光定量服務(wù)都有哪些內(nèi)容和要求?
點擊次數(shù):2511 更新時間:2020-09-24
  在PCR擴增中,添加了一對引物和特異性熒光探針。該探針是線性寡核苷酸,其兩端分別標記有熒光報告基團和熒光猝滅基團。探針完成后,報告基團發(fā)出的熒光信號被淬滅基團吸收,無法用PCR儀檢測到。在PCR擴增過程中(延伸階段),探針被Taq酶的5'-3'核酸外切酶活性消化并降解,從而使報告熒光團和淬滅熒光團分離,從而使熒光監(jiān)測系統(tǒng)能夠接收到熒光。信號,即每個擴增的DNA鏈,都有一個熒光分子形成,從而使熒光信號的積累與PCR產(chǎn)物的形成*同步,這是熒光定量服務(wù)的基礎(chǔ)。那么它服務(wù)的內(nèi)容和要求是什么?
 

熒光定量服務(wù)

  一、服務(wù)內(nèi)容:
  1、從動物細胞,人或動物組織中提取核酸;
  2、分析核酸的濃度和純度;
  3、熒光定量服務(wù)PCR檢測;
  (1)引物和探針的設(shè)計與合成;
 ?。?)定量和相對定量的選擇;
 ?。?)探針法和染料法的選擇;
 ?。?)通過熒光定量PCR檢測目標基因;
 ?。?)數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析;
  4、實驗前服務(wù):根據(jù)客戶提供的目標基因序列或NCBI序列號提供客戶引物和探針,并選擇引物和探針;
  5、正式實驗服務(wù):根據(jù)初步實驗中選擇的引物和探針,通過熒光定量PCR檢測樣品,并對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。
  二、熒光定量服務(wù)要求:
  1、請?zhí)峁┍M可能多的新鮮材料(各種材料的RNA提取量請參考“總RNA提取”),或直接提供純化的總RNA(大于5ug/樣品);(有關(guān)各種材料的DNA提取量,請參閱“DNA提取”),或直接提供純化的DNA(大于5ug/樣品)。
  2、請通過電子郵件提供已知的全長基因序列。
  3、請?zhí)峁┍M可能詳細的背景信息:DNA/RNA來源,豐度等。
 
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